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| 產(chǎn)地 | 國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 上海滬崢 |
| 貨號(hào) | HZ-75232 |
| 用途 | 僅限科研 |
| 包裝規(guī)格 | 20T/50T |
| 純度 | 詳詢客服% |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 |
上海滬崢專(zhuān)業(yè)生產(chǎn)銷(xiāo)售豬增生性腸炎PCR診斷試劑盒現(xiàn)貨，我公司供應(yīng)的分子生物學(xué)試劑品類(lèi)齊全，且具有優(yōu)勢(shì)價(jià)格，歡迎新老客戶咨詢認(rèn)購(gòu)。
產(chǎn)品詳細(xì)信息
名稱：豬增生性腸炎PCR診斷試劑盒現(xiàn)貨
規(guī)格： 20T/50T
品牌：上海滬崢
【用途】 用于豬增生性腸炎的檢測(cè)、診斷和流行病學(xué)調(diào)查
【操作步驟】
1. 病料處理
組織樣品：取適量小腸、回腸，剝離腸粘膜后，于滅菌研缽充分研磨，用PBS以1：3稀釋成均勻乳劑，-20℃反復(fù)凍融3次以上，8000 r/min離心5min，取上清。
2. DNA的抽提
2.1組織樣品：將組織樣品的上清液（或T，T為質(zhì)控樣品）200μl，加50μl SR-I和800μl SR-II，混勻，室溫靜置10min；渦旋，14000g g/min×1min，棄上清液；加入1 mL 70%乙醇，離心14000g /min×1min，棄上清，本操作重復(fù)1次；沉淀中再加入丙酮1mL，離心，14000g/min×1min；沉淀置于56℃干燥15min，加入TU-1 50μl， 離心12000g /min×2min，上清液放入-20℃保存，即為模板。
2.2 糞便樣品：稱取0.2g糞便，懸浮于900μl SR- II中，渦旋并離心，14000g離心1min，室溫靜置1h；吸取上清夜置于含有50μl SR-I的離心管中，室溫靜置10min，渦旋并離心，14000g /min×1 min；加入1 mL 70%乙醇，離心14000g /min×1min，棄上清，本操作重復(fù)1次；沉淀中再加入丙酮1mL，離心，14000g/min×1min；沉淀置于56℃干燥15min，加入TU-1 50μl，離心，12000g/min×2min，上清液放入-20℃保存，即為模板。
3.PCR操作
3.PCR操作
4.電泳
4.電 泳
稱量0.25g瓊脂糖，放入錐形瓶，加入25mL 1×TAE液（可配置50×濃縮液，儲(chǔ)存?zhèn)溆茫?，于微波爐中熔解，加入1μl的TU-9混勻。封閉好電泳槽，加入梳子，倒入瓊脂凝膠，待凝固后，將PCR產(chǎn)物6μl混合1.5μl TU-10，加樣于凝膠孔中，同時(shí)在相鄰孔加入3μl TU-11，在100V 電壓下，1×TAE液中電泳20min，在紫外成像儀下觀察結(jié)果。
【結(jié)果判定】
在295bp 位置出現(xiàn)擴(kuò)增帶，實(shí)驗(yàn)結(jié)果為陽(yáng)性
豬增生性腸炎PCR診斷試劑盒
【注意事項(xiàng)】
1. 每次使用，開(kāi)蓋之前請(qǐng)先瞬時(shí)離心，使試劑沉于管底。
2. 所有試劑在要求溫度下保存，-20℃保存試劑盡量減少反復(fù)凍融，使用后的試劑立即放回，避免在室溫?cái)R置太久。
3. 盡量建立PCR試驗(yàn)操作區(qū)，避免交叉污染。
4. 加樣和反應(yīng)程序嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行，由于操作失誤、移液器不精確、定時(shí)不準(zhǔn)確造成無(wú)結(jié)果情況，不予負(fù)責(zé)。
5. 吸頭、離心管和PCR管在使用前，要高壓滅菌，操作過(guò)程盡量不要用手接觸到管內(nèi)壁，可用鑷子夾取。
6. 注意防止試劑污染，在有效期限前用完。
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