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產(chǎn)地 | 國內(nèi) |
品牌 | 上海滬崢 |
貨號 | HZS0325 |
用途 | 僅限科研 |
包裝規(guī)格 | 50T/盒 |
純度 | 詳詢客服% |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 |
產(chǎn)品名稱: 禽流感病毒H9亞型檢測試劑盒
規(guī) 格: 50T
檢測方法: 實(shí)時熒光 PCR
保存方式: 2~8℃
有 效 期: 1年
產(chǎn) 地: 中國
用 途: 僅用于科研實(shí)驗(yàn)
訂購流程:禽流感病毒H9亞型檢測試劑盒
電話或通過在線客服咨詢產(chǎn)品→確定產(chǎn)品→提供單位收貨信息→確立合同→安排發(fā)貨。
1.報(bào)價(jià)含普票、運(yùn)費(fèi)。
2.進(jìn)口原裝產(chǎn)品要3-6周的貨期,詳細(xì)情況請咨詢客服。
3.訂貨時間為工作日每周一至周五17:00之前。
4.如因單位財(cái)務(wù)制度原因,可申請先發(fā)貨,報(bào)賬后付款(此條款僅限醫(yī)院、學(xué)校信譽(yù)良好的 客戶)。
ELISA常見問題:禽流感病毒H9亞型檢測試劑盒
利用ELISA進(jìn)行檢驗(yàn)常見的樣本一般包括血液(指血,靜脈血),尿,糞便,腦脊液,胸腹水,前列腺液,精液,陰道分泌物等,這些樣本收集的時間、方法和保存都有一定的要求。
1、抗原:ELISA抗原有三類:液體中純化的自然抗原、合成抗原和基因重組抗原。
純度不高可導(dǎo)致試劑盒的特異性不強(qiáng),合成抗原一般都是多肽抗原,
試劑盒一般為基因重組抗原??乖兌炔桓?,特異性就不強(qiáng),
2、抗體特異性和親和力的大小會影響試劑盒的特異性和敏感性
3、酶結(jié)合物,試劑盒的保存時間通常由酶的穩(wěn)定性決定。
最常用的就是辣根過氧化酶-HRP.其他還有堿性磷酸酶和β半乳糖苷酶。
ELISA溫浴和洗滌一般為磷酸鹽緩沖液(PBS)
堿性磷酸酶的話就不能用PBS洗滌了,因?yàn)闅埩舻腜BS會抑制一半的酶活性。
TMB顯色液取代了OPD為HRP最常用的色原底物。為氧化還原反應(yīng)(OPD對機(jī)體有突變作用,所以改用TMB)
我們的優(yōu)勢:禽流感病毒H9亞型檢測試劑盒
1,嚴(yán)格的質(zhì)控體系:所有試劑盒從原料到成品經(jīng)過嚴(yán)格的質(zhì)控,確保試劑盒質(zhì)量及穩(wěn)定性
2,產(chǎn)品不斷優(yōu)化,很好的靈敏度;
3,綜合指標(biāo)特性,研發(fā)便捷操作的試劑盒;
4,檢測驗(yàn)證樣本多樣;
5,專業(yè)的研發(fā)團(tuán)隊(duì)為客戶提供個性化的定*務(wù);
6,提供食品安全藥物殘留Elisa試劑盒,以及快檢試劑盒
7,完善專業(yè)的售前售后服務(wù)
操作步驟
1 病毒 RNA 的提取
1.1 取已處理的樣品、陰性對照和陽性對照,分別加入裂解液 600 μL,充分顛倒混勻,室溫靜置 3~
5 min。
1.2 將液體吸入吸附柱中(吸附柱要套上收集管,吸取液體時盡量不要吸到懸浮雜質(zhì),以免離心時 堵塞吸附柱),13000 rpm 離心 30 s。
1.3 棄去收集管中液體,加入 600 μL 洗液,13000 rpm 離心 30 s。
1.4 重復(fù)步驟 1.3。
1.5 棄去收集管中液體,13000 rpm 空柱離心 2 min,以除去殘留的洗滌液。
1.6 將吸附柱移入新的 1.5 mL 離心管中,向柱中央加入洗脫液 50 μL,室溫靜置 1 min,13000 rpm
離心 30 s,離心管中液體即為模板 RNA。
2 實(shí)時熒光 RT-PCR 操作
設(shè)被檢樣品、陰性對照和陽性對照總和為 N,則反應(yīng)體系配制如下: 試劑 體系
無菌無核酸酶水 2.7(N+1)μL
RT-PCR 反應(yīng)液 10(N+1)μL
酶混合液 0.4(N+1)μL
熒光探針 1.9(N+1)μL
將以上配制的反應(yīng)體系充分混勻后,分裝每個反應(yīng)管中各 15 μL。
分別取 5 μL 模板 RNA,加入相應(yīng)反應(yīng)管中,混勻并作好標(biāo)記,在熒光 PCR 儀上進(jìn)行以下反應(yīng):
45 ℃ 15 min,95 ℃ 1min;95 ℃ 5 s,60 ℃ 35 s,在每個循環(huán)第二步(60℃ 35s)收集熒光信號,共
40 個循環(huán)。(報(bào)告基團(tuán)“FAM”,淬滅基團(tuán)“None”)。
結(jié)果判定
1 結(jié)果分析條件設(shè)定 閾值設(shè)定原則:閾值線設(shè)定于剛好超過陰性對照擴(kuò)增曲線的點(diǎn)。不同儀器可根據(jù)儀器噪音
情況進(jìn)行調(diào)整。
2 結(jié)果描述及判定
陽性對照 Ct 值≤30 并出現(xiàn)特定的擴(kuò)增曲線,陰性對照無 Ct 值并且無特定擴(kuò)增曲線,實(shí)驗(yàn)結(jié)果成 立;被檢樣品 Ct 值≤30 并出現(xiàn)特定的擴(kuò)增曲線為 AIV 陽性;被檢樣品 30<Ct<37 并出現(xiàn)特定的擴(kuò) 增曲線,需重新取樣提取 RNA,擴(kuò)增后進(jìn)行結(jié)果判定,如仍是可疑,可判定為陽性;被檢樣品 Ct 值≥37 時,超過本方法檢測靈敏度范圍,判定為陰性;對于某些未呈現(xiàn) S 型曲線,但本底較高的樣 品,應(yīng)為陰性。