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產(chǎn)地 | 國內(nèi) |
品牌 | 上海滬崢 |
貨號 | HZS0350 |
用途 | 僅限科研 |
包裝規(guī)格 | 50T/盒 |
純度 | 詳詢客服% |
CAS編號 | |
是否進口 |
產(chǎn)品名稱:貓白血病病毒檢測試劑盒(實時熒光PCR法)
規(guī) 格: 50T
檢測方法: 實時熒光 PCR
保存方式: 2~8℃
有 效 期: 1年
產(chǎn) 地: 中國
用 途: 僅用于科研實驗
訂購流程:貓白血病病毒檢測試劑盒(實時熒光PCR法)
電話或通過在線客服咨詢產(chǎn)品→確定產(chǎn)品→提供單位收貨信息→確立合同→安排發(fā)貨。
1.報價含普票、運費。
2.進口原裝產(chǎn)品要3-6周的貨期,詳細情況請咨詢客服。
3.訂貨時間為工作日每周一至周五17:00之前。
4.如因單位財務制度原因,可申請先發(fā)貨,報賬后付款(此條款僅限醫(yī)院、學校信譽良好的 客戶)。
貓白血病病毒檢測試劑盒(實時熒光PCR法)
1. 樣品處理(樣本處理區(qū))
1.1 樣本前處理
組織:取50mg左右組織用玻璃勻漿器勻漿,勻漿后置入潔凈的1.5ml離心管中;
液體標本:取適量標本13000rpm離心2min,棄上清。
1.2 DNA提取
1) 對上述處理好的標本加入40ul 核酸提取液,100℃恒溫處理10分鐘,13,000 rpm離心5分鐘,取上清液轉(zhuǎn)移至新的1.5ml EP管,-20℃保存;
2. 試劑配制(試劑準備區(qū))
根據(jù)代檢測樣本總數(shù),設所需要的PCR反應管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1
管陰性對照+1管陽性對照),體系配制如下表:
試劑
WSSV 反應液
酶液
用量(樣本數(shù)為N)
20μl
1μl
3. 加樣(樣本處理區(qū))
將步驟1提取的DNA、陽性質(zhì)控品、陰性質(zhì)控品各取4μl,加入相應的
反應管中,蓋好管蓋,混勻,短暫離心。
4. PCR擴增(核酸擴增區(qū))
4.1 將待檢測反應管置于熒光定量PCR儀反應槽內(nèi);
◆ 注意事項
1.本試劑檢測靈敏度高。為了防止污染,實驗要分區(qū)操作。
1)第一區(qū):樣本制備區(qū)。
2)第二區(qū):模板添加區(qū)。
3)第三區(qū):擴增及產(chǎn)物分析區(qū)。
★ 分區(qū)之間*進行物理性隔離,避免人為因素造成的污染。
2.實驗過程中穿戴工作服和乳膠手套,不同區(qū)域獨立使用工具,需更換手套和實驗服。
3.嚴格按照操作步驟操作,試劑配制和加樣等步驟請嚴格按照說明書要求在冰盒上操作。
4.反應液中的成分對光敏感,應避光保存。試劑使用前要完全解凍,但應避免反復凍融,推薦使用前離心30秒,并按檢測頻次將反應液以適當體積分管保存。
5.反應結束后,擴增管請置于密封袋內(nèi)丟棄,當日清理,開蓋易造成氣溶膠污染,禁止開蓋。
6.不同批號試劑請勿混合使用,在有效期內(nèi)使用。
實驗操作
1.模板制備(樣本制備區(qū))
建議使用配套水生動物病毒基因組DNA/RNA提取試劑盒系列產(chǎn)品,具體過程詳見產(chǎn)品說明書。
2.添加模板(模板添加區(qū),放置于冰盒上進行)
剪下所需測試數(shù)的已含有反應液的PCR管,放置在室溫待解凍后,離心30秒后揭開封口膜,向每管反應液中分別加入5μL模板,順序為NG、待測樣品模板、PG-VH-P。蓋好配套的PCR管蓋后,渦旋混勻30s,離心1min,立即進行PCR擴增反應。
3. 擴增反應(擴增及產(chǎn)物分析區(qū))
使用熒光定量PCR儀,熒光基團選擇FAM,淬滅基團選擇TAMRA。