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| 產(chǎn)地 | 國(guó)內(nèi) |
| 品牌 | 上海滬崢 |
| 貨號(hào) | HZW0694 |
| 用途 | 僅限科研 |
| 包裝規(guī)格 | 48T/盒 |
| 純度 | 詳詢(xún)客服% |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 |
產(chǎn)品名稱(chēng)：甲型流感病毒H1-2009(IAV-H1-2009)核酸檢測(cè)
檢測(cè)方法： 實(shí)時(shí)熒光 PCR
規(guī) 格： 50T
保存方式： 2~8℃
有 效 期： 1年
產(chǎn) 地： 中國(guó)
用 途： 僅用于科研實(shí)驗(yàn)
訂購(gòu)流程甲型流感病毒H1-2009(IAV-H1-2009)核酸檢測(cè)
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ELISA常見(jiàn)問(wèn)題：甲型流感病毒H1-2009(IAV-H1-2009)核酸檢測(cè)
利用ELISA進(jìn)行檢驗(yàn)常見(jiàn)的樣本一般包括血液（指血，靜脈血），尿，糞便，腦脊液，胸腹水，前列腺液，精液，陰道分泌物等，這些樣本收集的時(shí)間、方法和保存都有一定的要求。
1、抗原：ELISA抗原有三類(lèi)：液體中純化的自然抗原、合成抗原和基因重組抗原。
純度不高可導(dǎo)致試劑盒的特異性不強(qiáng)，合成抗原一般都是多肽抗原，
試劑盒一般為基因重組抗原?？乖兌炔桓?，特異性就不強(qiáng)，
2、抗體特異性和親和力的大小會(huì)影響試劑盒的特異性和敏感性
3、酶結(jié)合物，試劑盒的保存時(shí)間通常由酶的穩(wěn)定性決定。
最常用的就是辣根過(guò)氧化酶-HRP.其他還有堿性磷酸酶和β半乳糖苷酶。
ELISA溫浴和洗滌一般為磷酸鹽緩沖液（PBS）
堿性磷酸酶的話(huà)就不能用PBS洗滌了，因?yàn)闅埩舻腜BS會(huì)抑制一半的酶活性。
TMB顯色液取代了OPD為HRP最常用的色原底物。為氧化還原反應(yīng)（OPD對(duì)機(jī)體有突變作用，所以改用TMB）
甲型流感病毒H1-2009(IAV-H1-2009)核酸檢測(cè)
結(jié)果分析判定
結(jié)果分析條件設(shè)定
設(shè)置基線(xiàn)（baseline）：一般情況下，對(duì)ABI 7500、7700等儀器設(shè)為6-15cycle，對(duì)PE5700設(shè)為3-15cycle,對(duì)MJ Research Option2設(shè)為6-12cycle。特殊情況可對(duì)基線(xiàn)適當(dāng)調(diào)整。
設(shè)置閾值（threshold）:以閾值線(xiàn)剛超過(guò)陰性對(duì)照擴(kuò)增曲線(xiàn)（無(wú)規(guī)則的噪音線(xiàn)）的zui高點(diǎn)。
結(jié)果判斷
陽(yáng)性：檢測(cè)樣本Ct值小于等于35.0，且曲線(xiàn)有明顯的指數(shù)增長(zhǎng)期；
可疑：檢測(cè)樣本Ct值大于35.0且小于40.0，重復(fù)一次實(shí)驗(yàn)，如果Ct值仍小于40.0，且曲線(xiàn)有明顯的指數(shù)增長(zhǎng)期，為陽(yáng)性，否則為陰性；
陰性：檢測(cè)不到樣本Ct值或Ct值為40。
6. 對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果的解析
實(shí)驗(yàn)室環(huán)境污染，試劑污染，標(biāo)本交叉污染會(huì)出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果；試劑運(yùn)輸，保存不當(dāng)或試劑配制不準(zhǔn)確引起的試劑檢測(cè)效能下降，出現(xiàn)假陰性或定量檢測(cè)不準(zhǔn)確的結(jié)果。
【注意事項(xiàng)】
所有操作嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行；
試劑盒內(nèi)各種組分使用前應(yīng)自然融化，混勻并短暫離心；
反應(yīng)液應(yīng)避光保存；
反應(yīng)中盡量避免氣泡存在，管蓋需蓋緊；
使用一次性吸頭、一次性手套和各區(qū)專(zhuān)用工作服；
樣本處理、試劑配制、加樣需在不同區(qū)進(jìn)行，以免交叉污染；
實(shí)驗(yàn)完畢后用10%次氯酸或75%酒精或紫外燈處理工作臺(tái)和移液器；
試劑盒里所有物品應(yīng)視為污染物對(duì)待，并按照《微生物生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室生物安全通則》進(jìn)行處理。.
實(shí)驗(yàn)操作
1.模板制備（樣本制備區(qū)）
建議使用配套水生動(dòng)物病毒基因組DNA/RNA提取試劑盒系列產(chǎn)品，具體過(guò)程詳見(jiàn)產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)。
2.添加模板（模板添加區(qū)，放置于冰盒上進(jìn)行）
剪下所需測(cè)試數(shù)的已含有反應(yīng)液的PCR管，放置在室溫待解凍后，離心30秒后揭開(kāi)封口膜，向每管反應(yīng)液中分別加入5μL模板，順序?yàn)?/span>NG、待測(cè)樣品模板、PG-VH-P。蓋好配套的PCR管蓋后，渦旋混勻30s，離心1min，立即進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng)。
3. 擴(kuò)增反應(yīng)（擴(kuò)增及產(chǎn)物分析區(qū)）
使用熒光定量PCR儀，熒光基團(tuán)選擇FAM，淬滅基團(tuán)選擇TAMRA。
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