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| 產(chǎn)地 | 國內(nèi) |
| 品牌 | 上海滬崢 |
| 貨號 | HZW0463 |
| 用途 | 僅限科研 |
| 包裝規(guī)格 | 48T/盒 |
| 純度 | 詳詢客服% |
| CAS編號 | |
| 是否進口 |
產(chǎn)品名稱大豆源性成分(Lectin)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)
包裝：48T
分類：pcr-熒光試劑盒
用途:本產(chǎn)品僅供科研與實驗使用，不用于臨床診斷等
目的：本試劑盒適用于檢測疑似感染者或發(fā)病動物等組織、體液或淋巴結(jié)等標(biāo)本中禽流感病毒rna，用于禽流感病毒感染的輔助診斷，其檢測結(jié)果僅供參考。
大豆源性成分(Lectin)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) PCR擴增時在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針，該探針為一寡核苷酸，兩端分別標(biāo)記一個報告熒光基團和一個淬滅熒光基團。探針完整時，報告基團發(fā)射的熒光信號被淬滅基團吸收；剛開始時, 探針結(jié)合在DNA任意一條單鏈上;PCR擴增時，Taq酶的5’端－3’端外切酶活性將探針酶切降解，使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離，從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號，即每擴增一條DNA鏈，就有一個熒光分子形成，實現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物形成完全同步。
大豆源性成分(Lectin)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 在PCR 管中加入下列成分：
成份 |
樣品 |
陽性對照 |
陰性對照 |
雙酶一管式 RT-PCR Buffer， 2× | 15 uL | 15 uL | 15 uL |
EMCV 專一性引物對 | 2 uL | 2 uL | 2 uL |
樣品 RNA | 1-5 uL | 無 | 2 uL |
EMCV 陽性對照 | 無 | 2 uL | 無 |
補超純水到 | 28 uL | 28 uL | 無 |
MMLV-Taq Mix | 2 uL | 2 uL | 2 uL |
[1] 輕柔混勻后上機，按下面參數(shù)進行 RT-PCR。
大豆源性成分(Lectin)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 電泳檢測RT-PCR 產(chǎn)物。預(yù)期的PCR 產(chǎn)物長度為 286 bp。
實驗操作
1.模板制備（樣本制備區(qū)）
建議使用配套水生動物病毒基因組DNA/RNA提取試劑盒系列產(chǎn)品，具體過程詳見產(chǎn)品說明書。
2.添加模板（模板添加區(qū)，放置于冰盒上進行）
剪下所需測試數(shù)的已含有反應(yīng)液的PCR管，放置在室溫待解凍后，離心30秒后揭開封口膜，向每管反應(yīng)液中分別加入5μL模板，順序為NG、待測樣品模板、PG-VH-P。蓋好配套的PCR管蓋后，渦旋混勻30s，離心1min，立即進行PCR擴增反應(yīng)。
3. 擴增反應(yīng)（擴增及產(chǎn)物分析區(qū)）
使用熒光定量PCR儀，熒光基團選擇FAM，淬滅基團選擇TAMRA。
大豆源性成分(Lectin)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 【參考值（參考范圍）】
1.試劑盒有效性判定：
（1）陽性對照：有典型S型擴增曲線或Ct值≤35。
（2）陰性對照：Ct值＞38或無Ct值，線形為直線或輕微斜線，無指數(shù)增長期。
2.標(biāo)本結(jié)果判定：
（1）陽性：標(biāo)本檢測結(jié)果Ct值≤35或有明顯指數(shù)增長期。
（2）可疑：標(biāo)本檢測結(jié)果Ct值在35～38范圍內(nèi)。此時應(yīng)對標(biāo)本進行重復(fù)檢測，如重復(fù)實驗結(jié)果Ct值仍在35～38范圍內(nèi)，有明顯指數(shù)增長期，則判定為陽性，否則為陰性。
（3）陰性：標(biāo)本檢測結(jié)果Ct值＞38或無Ct值。
【注意事項】
所有操作嚴(yán)格按照說明書進行；
試劑盒內(nèi)各種組分使用前應(yīng)自然融化，混勻并短暫離心；
反應(yīng)液應(yīng)避光保存；
反應(yīng)中盡量避免氣泡存在，管蓋需蓋緊；
使用一次性吸頭、一次性手套和各區(qū)專用工作服；
樣本處理、試劑配制、加樣需在不同區(qū)進行，以免交叉污染；
實驗完畢后用10%次氯酸或75%酒精或紫外燈處理工作臺和移液器；
試劑盒里所有物品應(yīng)視為污染物對待，并按照《微生物生物醫(yī)學(xué)實驗室生物安全通則》進行處理。.
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